Inertsil Amide色譜柱分析益母草中的鹽酸水蘇堿，

中國(guó)藥典2010年版（一部）中，對(duì)益母草中鹽酸水蘇堿的測(cè)定有如下描述：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.2%冰醋酸溶液（80:20）為流動(dòng)相，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，理論板數(shù)按鹽酸水蘇堿峰計(jì)算不得低于6000。
對(duì)照品溶液的制備取鹽酸水蘇堿對(duì)照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
本品按干燥品計(jì)算，含鹽酸水蘇堿(C7H13O2．HCl)不得少于0.50%。
　為什么需要用丙基酰胺柱來(lái)測(cè)鹽酸水蘇堿呢？丙基酰胺硅膠基質(zhì)的柱子是什么柱子呢？

　首先我們要了解鹽酸水蘇堿的特性，從鹽酸水蘇堿的結(jié)構(gòu)式來(lái)看，即可知道鹽酸水蘇堿的極性是非常大的，普通的反相色譜對(duì)它的保留分離能力較弱甚至不保留，而親水型作用色譜柱一般固定相為極性的固定相，因此能為強(qiáng)極性的化合物提供良好的保留，因此是分離這類(lèi)化合物的*選擇。 
　親水作用色譜（HILIC）作為一種分離極性化合物的液相色譜模式，是一種以極性固定相（如硅膠、烷基酰胺基、二羥丙基，氨基鍵合硅膠等）及水-極性有機(jī)溶劑為流動(dòng)相的色譜分離模式，它與正相色譜相似，水是強(qiáng)溶劑，極性化合物比非極性化合物的保留時(shí)間長(zhǎng)，與反相色譜的保留順序恰好相反。強(qiáng)極性化合物的分離問(wèn)題引起了各個(gè)研究領(lǐng)域的重視，如藥物分析、代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等研究領(lǐng)域都不同程度地涉及強(qiáng)極性化合物的分離問(wèn)題，近年來(lái)，HILIC 越來(lái)越受到關(guān)注和重視。
　烷基酰胺鍵合硅膠克服了傳統(tǒng)正相色譜柱在水相條件下不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，其梯度條件通常是初始為高比例有機(jī)相，逐步加大水相含量，極性丙基酰胺鍵合硅膠的HILIC色譜柱在反相條件下，可以有效的保留極性化合物，我公司Inertsil Amide色譜柱，就是一樣一款非常適合于益母草中鹽酸水蘇堿測(cè)定的柱子，測(cè)定方法及譜圖如下：

1、分析條件

色譜柱：Inertsil Amide 250*4.6*5
柱溫：30℃
流速：1.0ml/min
進(jìn)樣量： 20ul
檢測(cè)器：Alltech 3300 ELSD（漂移管溫度：50度、載氣流量1.5L/min）
流動(dòng)相：80%乙腈+20% 0.2%冰醋酸溶液
進(jìn)樣濃度：藥材提取液 1g/25ml提取液
PS：紅字部分為藥典規(guī)定