在依利特色譜柱實驗過程中經常遇到的情況：

　　(1) 新的色譜柱，直接上分析條件來分析樣品，發現分離情況不穩定。

　　(2) 新的色譜柱，使用中發現壓力突然升高。

　　(3) 新的色譜柱，發現分離度、保留時間發生了變化。

　　(4) 色譜柱使用不頻繁，一開始分析樣品效果比較好，但是，在使用過程中發現柱效下降快、峰形異常的情況。

　　(5) 色譜峰形異常，基線不穩。

　　當發生以上情況，請仔細檢查，是否有某個操作疏忽了？

　　1）測試柱性能

　　通常情況下，我們建議用戶在拿到色譜柱后，件事情就是在一臺性能完好的儀器系統上，按照廠家說明書對色譜柱進行柱效測試。其實，對于一個合格的色譜分析工作者來說，拿到一根新色譜柱，要開始一個課題之前，都會這樣做，目的有二：1、了解色譜柱之前的情況并判斷色譜柱是否正常。2、將檢測結果小心保存， 當實驗過程中發現異常時，在檢測柱效進行對比，來進一步排查原因。

　　2）當反相使用高濃度緩沖鹽時，注意過渡

　　在使用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑時，一定要注意應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，造成系統堵塞。另外，在發現系統壓力升高異常時，要仔細檢查，段段排除包括保護柱、混合器、管路或者流通池等。

　　3）當更換色譜柱時，原來的實驗情況發生變化

　　首先，如果之前開發方法時色譜柱已經做過別的樣品，那么之前的樣品或使用的流動相對這個樣品分析可能有干擾，只能重新找條件。建議：開發方法時使用新的色譜柱。（其次，如果是更換了品牌發生這樣的情況，可能是由于不同品牌的鍵合技術不同，造成了選擇性的細微差異 ，需要調整條件，并再次確定出峰順序（有些樣品的洗脫順序會改變）。再次，如果是更換了同品牌型號的新的色譜柱發生這種情況，請檢查之前分離時目標與雜質的分離度是否符合要求（Rs大于1.5），如果一開始只是勉強分開（Rs小于1.5），那只能說明方法沒有優化好，需要再次進行優化。

　　4）樣品及前處理

　　樣品要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預處理柱（SPE）對樣品進行預處理；若樣品不便處理，要使用保護柱。流動相中所使用的各種有機溶劑要使用色譜純，配流動相的水應該是超純水或雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動相。另外，裝流動相的容器和色譜系統中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。

　　5）色譜柱基線問題

　　通常情況，基線問題是由于系統或者流動相引起的，和色譜柱關系不大。